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賴氨酸(LYS)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:賴氨酸(LYS)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑 英文名稱:Bolton Selective Enrichment broth additive 產(chǎn)品規(guī)格:2ml*5 改良CCD瓊脂添加劑 英文名稱:CCD Agar Additive 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5 脫纖維羊血 英文名稱:Off fiber sheep blood 產(chǎn)品規(guī)格:50ml 改良Skirrow瓊脂添加劑

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪  問  量:1182

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:賴氨酸(LYS)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6538

產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

賴是人體必需氨基酸之一,能促進(jìn)人體發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴含量甚低,且在加工過程中易被破壞而缺乏,故稱為限制性氨基酸。

測(cè)定原理:

蛋白質(zhì)中的賴具有一個(gè)游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì),其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴的含量成線性關(guān)系。亮與賴的碳原子數(shù)目相同,而且僅有個(gè)游離氨基(ε-NH2),所以通常用亮配制標(biāo)準(zhǔn)液。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、水浴鍋。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

2 ug pDsRed-Monomer-Golgi pDsRed-Monomer-Golgi 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LS) Lactose Sulfite Medium(LS) 250g

2 ug pPICZα C pPICZα C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50T 志賀氏菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

200 mL 小鼠 NK 細(xì)胞分離液1.076 Cell Separation Solution -20℃保存

250mL HEPES Buffer,1M,pH8.5  HEPES Buffer,1M,pH8.5  常溫保存

2mL dTTP溶液,2.5mM dTTP Solution -20℃保存

2 ug pLJM1-EGFP pLJM1-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

Letheen肉湯 Letheen Broth 250g

1瓶 MRC-5細(xì)胞株 MRC-5 低溫運(yùn)輸和保存

EEM培養(yǎng)基 EEM medium 250g

賴氨酸(LYS)測(cè)試盒微量法Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1ml

T Beta 10  胸素β10抗體 規(guī)格: 0.1ml

CO4A2  膠原蛋白4a2亞基抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

BCL2L10  BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Prominin 2  造干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/PE  PE標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

TOPO II/TOPO II Alpha  DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體 規(guī)格: 0.1ml

RIMKLA/FAM80A  核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml

SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase  雌激素硫酸轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.1ml

COMMD9  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-NFATc2(Ser326)  磷酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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