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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯質量規(guī)格：0.98Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester

CL-0236U-2 OS(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯質量規(guī)格：>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯質量規(guī)格：0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester

人肺動脈成纖維細胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸質量規(guī)格：98%，BR，L型H-HomoArg-OH

HCC38細胞，人導管癌細胞 昆蟲細胞系,SF-9細胞 肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-D-纈氨酸質量規(guī)格：>98%,BRBoc-D-Val-OH
間充質干細胞成骨細胞分化生長添加物MODS杯[6]芳烴(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基杯[6]芳烴(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

人牙周膜成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫雜杯[4]芳烴(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene質量規(guī)格：>94.0%(HPLC)

T6-Swiss albino細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 B16(小鼠色素瘤細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫雜[4]芳烴鈉鹽(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene  Salt質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
人腎臟上皮細胞HREpiC4-羥基心得安β-D-葡萄糖苷酸 質量規(guī)格：美國進口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照) S(-)-鹽酸心得安質量規(guī)格：美國進口S(-)-Propranolol • HCl

IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細胞雷洛昔芬-d4質量規(guī)格：美國進口Raloxifene-d4

CM-H115人腦動脈血管內皮細胞*培養(yǎng)基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口Raloxifene 6-Glucuronide

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞(+)-兒茶素水合物質量規(guī)格：HPLC>98%,進分(+)-Catechin hydrate
磷酸葡萄糖變位酶EC 5.4.2.2輸尿管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質量規(guī)格：>98%,BR

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質量規(guī)格：>99%,BR

大鼠氣管上皮細胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質量規(guī)格：BR

PG49細胞，人肺腺癌細胞系 轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA1細胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質量規(guī)格：0.98

SVEC4-10(小鼠結內皮細胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質量規(guī)格：>98%,BR
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。