儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細胞柳胺酚,利膽酚(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide

CM-R099大鼠表皮色素細胞*培養(yǎng)基100mL柳胺酚,利膽酚質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide

Saos-2，人成骨肉瘤細胞甲磺酸瑞波西汀質(zhì)量規(guī)格：>97%Reboxetine mesylate

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0927 人脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL酮色林,凱他色林質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRKetanserin

小鼠雪旺細胞MSC殼聚糖(M.W70w-100w)質(zhì)量規(guī)格：脫乙酰度≥95%,,粘度100-200 mpa.sChitosan
人臍動脈內(nèi)皮細胞 Human鹽酸米托蒽醌（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Mitoxantrone HCl

FCGR3 Others Mouse 小鼠 FCGR3 / CD16 人細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑立賓質(zhì)量規(guī)格：>98%,細胞培養(yǎng)級Mizoribine

大鼠肝細胞;IAR20鹽酸美西律（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Mexiletine

REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 美洛西林鈉質(zhì)量規(guī)格：>96%,CP,BRMezlocillin

人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL美洛西林鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Mezlocillin
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×23-metxoxypxenylaceticacid3-甲氧基5克BR，75%水溶液

APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細胞裂解液 (陽性對照) 1 1-二芐基-4 4-二錄化二嗡水合物 1,1'-DIBqNZYL-4,4'-BIPYRIDINIUM DICHLORIDq 110-19-8

人肺微血管內(nèi)皮細胞裂解物HPMECL四水錄化錳(II) Mcngcnqsq chloridq tqtrchydrctq 13446-34-9

XPNPEP2 Others Human 人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (+)-Catechinhydrate(+)-兒茶速500U高，98%

BRL 大鼠肝細胞(s)-(+)-2-基-1-L-Alaninol
WB封閉液BSA人絨毛膜內(nèi)皮細胞 Human硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素Amikacin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格：含量674-786ug /mg,USP30

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸阿米卡星(標準品)Amikacin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格：效價測定

人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC兩性霉素BAmphotericin B質(zhì)量規(guī)格：>750ug /mg,USP,細胞培養(yǎng)級

NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)兩性霉素B(標準品)Amphotericin B質(zhì)量規(guī)格：含量測定

恒河猴腎細胞;LLC-MK2醋酸增血壓素Angiotensin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

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