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土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(SLiP)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(SLiP)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Half –Fraser 添加劑進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Half-Fraser Supplement添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)5ml*2改良緩沖蛋白胨水(MBP)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Modified Buffered Peptone Water用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)250EB增菌液進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)EB Enrichment Broth用于單

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-24
  • 訪  問(wèn)  量:472

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng):土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(SLiP)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6864

產(chǎn)品分類(lèi):土壤系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

測(cè)定原理

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,在310nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

250mL MES Buffer,1.0M,pH5.5  MES Buffer,1.0M,pH5.5  常溫保存

100次 植物種屬鑒定PCR Mix 1(細(xì)胞核ITS) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMSCV-neo pMSCV-neo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

5mL dNTP溶液,100 mM dNTP Solution,100 mM -20℃保存

1瓶 RBL-2H3細(xì)胞株 RBL-2H3 低溫運(yùn)輸和保存

40%膽汁肉湯 40%Bile Broth 100g

5mg 環(huán) A Cyclosporin A 4℃保存

50T 產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

30次 一站式長(zhǎng)效期SDS-PAGE電泳套裝 (適合2-30 kD蛋白) One-Stop Stable SDS-PAGE  Pack 4℃保存(上樣緩沖液需要-20℃保存)

2 ug pYCP211 pYCP211 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 細(xì)菌DNAout Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存)

土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶(SLiP)測(cè)試盒微量法ALDH1A1  胞質(zhì)乙醛脫1抗體 規(guī)格: 0.2ml

DC-SIGN/CD209  細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-ELk1(Thr417)  磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格: 0.1ml

BMP6  骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

NCOA2  類(lèi)固醇受體激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlGREB1  雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C1ORF111  1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框111抗體 規(guī)格: 0.2mlATXN1/Ataxin-1  脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

HP1 alpha  異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α)抗體 規(guī)格: 0.1mlIntegrin alpha L/CD11a  整合素αL抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlDMTF1  周期素D相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

ERdj5/DNAJC10  Erdj5/DNAJC10蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlG alpha gust  Gα gust抗體 規(guī)格: 0.2ml

TSPAN1  四分子交聯(lián)體1抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2mlPCDHA10/CNRN8  鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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