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簡要描述：糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：布氏瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Brucella Agar250克彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗(yàn)和純化培養(yǎng)布氏肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)Brucella Broth250克用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備紅四氮唑沙保羅進(jìn)口、國產(chǎn)TTC-Sabourand,s Medium250克用于分離真菌，酵母菌等三苯四唑瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國產(chǎn)TTC Agar Base250克彎曲桿菌
產(chǎn)品型號： 廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商更新時(shí)間：2023-12-23訪 問 量：863詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6984
產(chǎn)品分類：糖原系列
商品介紹：
測定意義: 糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和無活性的糖原磷酸化酶b（GPb）兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。 測定原理： GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH，在340nm下測定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）時(shí)測定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）時(shí)測定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pBKS pBKS 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
100mL DNEDTA溶液,0.5M,PH8.01
2 ug pFastBac-Dual pFastBac-Dual 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
硫乙醇酸鹽流體(顆粒) 250g
1瓶 Ca759細(xì)胞株 Ca759 低溫運(yùn)輸和保存
細(xì)菌總數(shù)顯色 Total Genes Chromogenic Medium 250g
100U Sulfolobus DNA 聚合 IV Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存
強(qiáng)化梭菌（RCM） Reinforced Clostridium Medium 250g
200mL 自誘導(dǎo)液體（arab啟動(dòng)子）
2 ug pOG2-cre pOG2-cre 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
NT NT Medium 250g
糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法TSPAN12/NET-2 四分子交聯(lián)體12抗體（四旋蛋白） 規(guī)格: 0.2ml
FLT-3/CD135 FMS樣酪激3 規(guī)格: 0.2ml
DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus) 穿膜蛋白DLK1抗體（C端） 0.1ml
WIF1 Wnt信號抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
Cyclin L/CCNL1 周期素L抗體 規(guī)格: 0.2ml
PLK4/STK18 絲/蘇蛋白激18 規(guī)格: 0.2ml
C15orf41 15號染色體開放閱讀框41抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 磷酸化磷酯Cγ1抗體 規(guī)格: 0.1ml
EDNRB 內(nèi)皮素受體B抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Syntaxin 1a(Ser14) 磷酸化突觸融合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
NGAL/Lipocalin 2 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
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